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科普:正确配置DNS试剂的步骤

发布时间:2022-04-11     作者:德尔塔   分享到:

【产品介绍】:

DNS试剂,一种可用于物质中还原糖含量测定的试剂。用途是1.在生化试验中,DNS常用于还原糖含量的测定;也可用于生物质中半纤维素含量的测定。它们均要与标准葡萄糖曲线进行比对。     酒石酸钾钠18.2g,溶于50ml蒸馏水中,加热,于热溶液中依次加入3,5-二硝基水杨酸0.63g,NaOH2.1g,苯酚0.5g,搅拌至溶,冷却后用蒸馏水定容至100ml,贮于棕色瓶中,室温保存。但是一定要注意,3,5-二硝基水杨酸和NaOH的加入时间一定要很近,或者是先加入NaOH。否则会产生难溶的沉淀,导致配制溶液失败。且配置过程中,溶液加热温度不宜超过50摄氏度。        DNS试剂配制标准: Ghose法 DNS试剂的配制 甲液:将6.9 g结晶苯酚溶于15.2 mL10%NaOH溶液,蒸馏水稀释至69 mL,在此溶液中加入6.9 g亚硫酸氢钠。 乙液:将255 g酒石酸钾钠溶于300 mL10%NaOH溶液中,再加入880 mL1%的3,5-二硝基水杨酸溶液。 将甲乙二溶液混合即得黄色试剂,储于棕色瓶中放置7-10 d后使用。在棕色瓶内保存一年有效。 轻工业部标准DNS试剂的配制 称取3,5—二硝基水杨酸(10土0.1) g,置于约600 mL水中,逐渐加入氢氧化钠10 g,在50 ℃水浴中(磁力)搅拌溶解,再依次加入酒石酸甲钠200 g、苯酚(重蒸)2 g和无水亚硫酸钠5 g,待全部溶解并澄清后,冷却至室温,用水定容至1000 mL,过滤。贮存于棕色试剂瓶中,于暗处放置7 d后使用。 农业部标准DNS试剂的配制   称取3,5-二硝基水杨酸3.15 g(化学纯),加水500 mL。,搅拌5 s,水浴至45 ℃。然后逐步加入100 mL 0.2g/ mL的氢氧化钠溶液,同时不断搅拌。直到溶液清澈透明(注意:在加入氢氧化钠过程中,溶液温度不要超过48℃)。再逐步加入四水酒石酸钾钠91.0 g、苯酚2.50 g和无水亚硫酸钠2.50 g。继续45 ℃水浴加热,同时补加水300 mL,不断搅拌,直到加入的物质完全溶解。停止加热,冷却至室温后,用水定容至1000 mL。用烧结玻璃过滤器过滤。取滤液,储存在棕色瓶中,避光保存。室温下存放7 d后可以使用,有效期为6个月。     在配制的过程中,如果操作不合理,会出现溶液变黑,或者有鸡蛋花一样的絮状沉淀出现。这给实验者造成了很大的麻烦。我总结了一下自己在配制过程中的经验教训,把配制的步骤叙述如下: 1..称取DNS(具体重量,按照你的配方来,下同),加水500,水浴45度; 2.逐步加入氢氧化钠溶液,同时不断搅拌,直到溶液清澈透明;(a.药品中的氢氧化钠要配制成溶液;直接加颗粒,可能产生鸡蛋花; b.加入氢氧化钠溶液时,溶液的温度会上升,所以要慢慢加,不停地搅拌,同时溶液的温度不能超过48度;温度高了,溶液颜色变黑。) 3. 逐步加入四水酒石酸钾钠、苯酚和无水亚硫酸钠;(顺序不要更改!) 4.继续45度水浴,同时补水,不断搅拌,直到加入的物质完全溶解;(一定要有耐心地搅拌!) 5. 停止加热,冷却至室温,用水定容。 6. 烧结玻璃漏斗过滤(过滤与否,影响不大。) 7. 储存在棕色瓶中,避光保存。室温下存放7天后使用。有效期为6个月。(时间不忙的话,按照时间来操作,时间紧迫了,时间提前个几天,推后几天,也可以用的。) 德尔塔公司主要代理产品: ELISA试剂盒:进口ELISA试剂盒,国产ELISA试剂盒,人elisa试剂盒,大鼠ELISA试剂盒,小鼠ELISA试剂盒等。 培养基:微生物培养基,显色培养基,BD培养基,gibco培养基等。 血清:胎牛血清,人血清,动物血清,NQBB,Hyclone,Gbico原装血清 。 生物试剂:Amresco,Sigma,ABM,BIO-RAD,BD,ABCAM等进口试剂。 标准品对照品:进口对照品,进口对照药材,进口标准品. 抗体:一抗,二抗,流式抗体等。 放免试剂盒:进口放免试剂盒,国产放免试剂盒,进口美国凤凰等知名品牌放免试剂盒。 实验室代测服务:放免代测,WB实验,免疫组化代测,荧光定量PCR代测,病理细胞染色代测,生化实验代测等。 原创作者:德尔塔