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N,N-二甲基甲酰胺的反应性与不相容性介绍
作者：德尔塔 日期：2022-02-18
1.能与氧化剂、卤代烃和无机硝酸盐剧烈反应。 2.与空气形成爆炸性混合物。与四氯化碳和其他卤化化合物接触，尤其是与铁或强氧化剂接触可能会引起火灾和爆炸。与烷基铝发生剧烈反应。与非氧化性无机酸不相容；侵蚀一些塑料、橡胶和涂层。 3.四氢硼酸钠 (15.7% wt) 在DMF中的热溶液将发生剧烈的失控热分解，固体残留物达到 310 摄氏度的温度。诱导期取决于温度，62 摄氏度为 45 小时，90 摄氏度为 45 分钟摄氏度。 4.二甲基甲酰胺与二异氰酸基甲烷接触导致异氰酸酯剧烈聚合。 5.在看似漫长的诱导期后，三聚氯氰与DMF会发生剧烈的放热反应。最初形成的 1:1 加合物在 60 摄氏度以上分解，释放出二氧化碳并形成二聚不饱和季铵盐。 6.为了还原母体杂环，将 2,5-双-内-二氯-7-硫双环(2.2.1) 庚烷在DMF中的溶液添加到四氢硼酸钠在相同溶剂中的热溶液中，当剧烈发生爆炸。这可能是由于二氯化合物与溶剂的相互作用或四氢硼酸盐在DMF中的热溶液的已知不稳定性引起的。 7.三乙基铝和DMF的混合物在加热时会发生爆炸。 8.将氢化钠和二甲基甲酰胺的混合物加热至并保持在50摄氏度。将温度升高至 75 摄氏度的放热反应无法通过外部冷却控制，并且中试规模的反应器内容物爆发。后来发现在26摄氏度开始放热，随后反应迅速加速。建议避免将混合物保温，特别是在放大反应时。 9.叠氮化锂和二甲基甲酰胺在制备叔烷基叠氮化物过程中在 25 摄氏度下是稳定的，在 200 摄氏度以上，混合物对冲击敏感且具有高度爆炸性。 10.用金属钠加热DMF会发生剧烈反应。 11.溴和二甲基甲酰胺的相互作用是极度放热的，在高压釜中的限制条件下，内部温度和压力超过 100摄氏度和135Pa，导致爆破片失效。 12.在DMF溶液中氯化过程中发生热失控反应后，调查表明DMF中的饱和氯溶液是危险的，并且在绝热或非绝热条件下都会自热和喷发。 13.在冷DMF溶液中将仲醇氧化成酮的过程中，加入固体三氧化铬会引起燃烧
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氯化钠相对分子量相关信息介绍
作者：德尔塔 日期：2022-02-18
在化学中，分子式重量是通过将化学式中每个元素的原子量（以原子质量单位为单位）乘以分子式中存在的该元素的原子数，然后将所有这些乘积相加得出的量。 使用化合物的化学式和元素周期表，我们可以累加原子量并计算该物质的分子量。 寻找摩尔质量始于克每摩尔（g / mol）的单位。计算化合物的分子量时，告诉我们一摩尔该物质有多少克。公式重量只是给定公式中所有原子的原子质量单位的重量。 在此站点上，常见的要求是将克转化为摩尔。要完成此计算，您必须知道要转换的物质。原因是该物质的摩尔质量影响转化率。这个站点解释了如何找到摩尔质量。 配方重量对于确定化学反应中试剂和产物的相对重量特别有用。从化学方程式计算出的这些相对权重有时称为方程式权重。 此站点上使用的原子量来自NIST。我们使用最常见的同位素。这是基于各向同性加权平均值计算摩尔质量（平均分子量）的方法。这与分子质量不同，后者是定义明确的同位素的单个分子的质量。对于体积化学计量计算，我们通常确定摩尔质量，也可以称为标准原子量或平均原子质量。 如果用于计算摩尔质量的公式是分子式，则所计算的公式重量是分子量。化合物中任何原子或原子团的重量百分比可以通过将分子式中的原子（或原子团）的总重量除以分子式重量再乘以100来计算。
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丝裂霉素C处理细胞实验介绍
作者：德尔塔 日期：2022-02-18
为了抑制增殖而用丝裂霉素C处理的鼠3T3成纤维细胞已被广泛用作饲养层，以增强人角质形成细胞的体外培养。为了确定造成这种增强作用的可能因素，进行了研究以确定丝裂霉素C处理后是否保留了3T3细胞产生的类花生酸生成。因此，将未处理的和经丝裂霉素C处理的3T3细胞均与[1-14C]花生四烯酸一起孵育，并通过薄层色谱法评估其定性生成的[1-14C]标记的类花生酸。内源性产生的类花生酸的水平通过对从处理过的细胞和未处理的细胞进行孵育获得的培养上清液进行的特异性放射免疫分析法定量确定。这些研究的结果表明，丝裂霉素C处理虽然阻止了3T3细胞的增殖，但却未能改变其前列腺素E2或6-酮-前列腺素F1α的生成。此外，在平行培养中，未处理的3T3细胞在达到汇合时停止生成类花生酸，而丝裂霉素C处理的未增殖的3T3细胞继续生成类花生酸。
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Trizol Invitrogen提取RNA和DNA介绍
作者：德尔塔 日期：2022-02-18
TRIzol提取RNA和DNA简要说明 准备试剂：TRIzol氯仿100%异丙醇%乙醇无RNase的水handy pestle 操作步骤：RNA操作在冰上进行 1、每50～100mg组织加入1ml TRIzol ，handy pestle匀浆RNALater保存的组织，（其实组织50mg提出的RNA大大富余） 2、将匀浆样品在室温（15～30℃）放置5分钟，使核酸蛋白复合物完全分离。 3、每使用1ml TRIzol加入0.2ml氯仿，用手剧烈振荡15秒，室温放置3分钟。 4、4℃12,000×g离心15分钟。样品分为三层：底层为黄色有机相，上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中，水相体积约为所用TRIzol试剂的约50%。 5、用200ul的枪2枪把水相转移到新管中（样本足够因此少抽以防止DNA污染）。 6、1mlTRIzol加入0.5ml100%异丙醇，颠倒混匀，室温放置10分钟。 7、4℃12,000×g离心10分钟，移去上清，之后可以看到RNA沉淀。 8、1ml TRIzol至少加1ml 80%乙醇。（-20°放一年） 10、vortex混匀，4℃下7500×g离心5分钟，弃上清，也可见沉淀。 9、室温放置干燥RNA沉淀，大约5～10分钟即可.加入无RNase的水（乳腺癌100mg样本加50ul浓度大约为2ug/ul），用枪头吸打几次，稍微离心，55～60℃放置10分钟使RNA溶解。可-80℃保存一段时间，**马上逆转录。 10、260比280是1.8-2.1（低可能是污染，也可能测时候的问题）产量公式：260×稀释倍数×40=ug/ml DNA的分离准备试剂：乙醇0.1M柠檬酸钠（含10%乙醇） 75%乙醇8mM NaOH 操作步骤： 样品加氯仿分层后，移去上层水相， 1mlTRIzol加0.3ml无水乙醇混匀，颠倒混匀，室温放置3分钟 4℃2000×g离心5分钟。 去上清，用含10%乙醇的0.1M柠檬酸钠洗涤DNA沉淀。每用1mlTRIzol加入1ml柠檬酸钠，室温放置30分钟， 4℃2000×g离心5分钟，弃上清 （大于200ug的DNA重复一次1-3步骤）。 1ml TRIzol加入1.～2 ml75%乙醇，室温放置10～20分钟不时颠倒混合4℃2000×g离心5分钟， 弃上清。 室温放置晾干DNA 5～15分钟，用8mM NaOH 300l8mMNaO
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磷脂酰胆碱的结构及脱脂分离介绍
作者：德尔塔 日期：2022-02-18
磷脂酰胆碱的结构式： 磷酸甘油酯甘油分子的中央碳原子是不对称的。天然的磷酸甘油酯都具有相同的立体化学构型,属于L系。磷酸甘油酯中：如X为胆碱，则应命名为：1，2-二酰基-sn-甘油-3-磷酰胆碱，亦称L-3-磷脂胆碱,俗名卵磷脂。图上构型中R1，R2代表脂肪酸链,X为连接在磷酸上的小分子化合物；名称中sn为立体化学专一编号。 磷脂酰胆碱脱脂分离： 在磷脂各种组分中，PC在醇中的溶解度比PE及PI高，据此可分离出PC。进一步通过氧化铝等处理可得到高含量的磷脂酰胆碱。通常使用的分离溶剂是C1~C4的低级醇类，如甲醇、乙醇、异丙醇、丙二醇等。用90%的乙醇对PC/PE=1.2的天然磷脂进行萃取，可以得到PC/PE=8的高PC产品。为了得到更高浓度，还可以用吸附剂分馏法或色谱分离法。用丙二醇提取，加入柠檬酸可制得食用固体磷脂。用异丙醇分离效果好，但溶剂用量大。
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CCK-8试剂盒实验注意事项及相关问题
作者：德尔塔 日期：2022-02-18
Cell Counting Kit-8 简称CCK-8试剂盒，为MTT法的替代方法，是一种基于WST（水溶性四唑盐，化学名：2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐）的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。可用于药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏等试验。 活力计算：. 细胞活力（％）=[A(加药)－A(空白)]／[ A(0加药)－A(空白)]×100 A（加药）：具有细胞、CCK-8溶液和药物溶液的孔的吸光度 A（空白）：具有培养基和CCK-8溶液而没有细胞的孔的吸光度 A（0 加药）：具有细胞、CCK-8溶液而没有药物溶液的孔的吸光度 细胞活力：细胞增殖活力或细胞毒性活力 注意事项： ①建议先做几个孔摸索接种细胞的数量和加入CCK-8试剂后的培养时间。 ②白细胞可能需要培养较长时间。 ③当使用标准96 孔板时，贴壁细胞的最小接种量至少为1 ,000个/孔 (100 μL培养基)。检测白细胞时的灵敏度相对较低，因此推荐接种量不低于2,500 个/孔 ( 100 μL培养基)。如果要使用24孔板或6孔板实验，请先计算每孔相应的接种量，并按照每孔培养基总体积的10% 加入CCK-8溶液。 ④如果没有450nm的滤光片，可以使用吸光度在430-490 nm 之间的滤光片，但是450nm检测灵敏度最高。 ⑤培养基中酚红的吸光度可以在计算时，通过扣除空白孔中本底的吸光度而消去，因此不会对检测造成影响。 常见问题： 1.一个孔中应接种多少个细胞？ 当使用标准96孔板时，贴壁细胞的最小接种量至少为1,000 个/孔 (100 μl 培养基)。检测白细胞时的灵敏度相对较低，因此推荐接种量不低于2,500 个/孔 (100 μl 培养基)。如果要使用24孔板或6孔板实验，请先计算每孔相应的接种量，并按照每孔培养基总体积的10%加入CCK-8溶液。2.能否用384孔板进行试验？ 可以。向各孔中加入培养基体积10%的CCK-8溶液，如果加入的CCK-8体积太少，可以先将CCK-8溶液稀释1倍，然后加入培养基体积20%的量。 3.能否用24孔板进行试验？
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