质粒提取磁珠试剂盒

操作方法

1.裂解

取1-2ml（低拷贝质粒可取2-5ml）过夜培养的菌液至1.5mlEP 管中，12,000rpm 离心1min，尽量吸净上清，加入100μl Buffer A（高拷贝可用50ul），振荡重悬菌体，保证无菌块存在。加入100μl Buffer B 温和颠倒混匀6～9 次，至溶液清澈可见，时间3min。加入75μl Buffer C 立即温和颠倒混匀6～9 次，溶液出现絮状沉淀，静置冰上2min 以充分中和。12,000rpm 离心10min。

2.结合

取上清于新的1.5mlEP 管中,加入振荡混匀的磁珠5μl，异丙醇250μl（自备），颠倒混匀5min。将EP 管置于磁力架上进行磁分离，吸弃废液（吸净管盖及管底残液）。

3.洗涤

加入500μl 洗涤液，轻柔混匀1-2min，然后磁分离，吸净管盖及管底的残液；

4.洗脱

室温晾干5min，加入100μl 洗脱液，缓慢抽吸混匀，65℃温浴10min。每隔2～3min 轻摇EP 管几下混匀。然后磁分离，小心吸取上清液至新的EP 管中，进行下游实验。